骨髄線維症におけるジャカビの作用機序

ジャカビの作用機序Movie

各種キナーゼに対する活性及び選択性（in vitro）
JAKファミリーに対する酵素阻害活性

ルキソリチニブはJAKファミリーに対して酵素阻害活性を示し、特にJAK1及びJAK2に高い選択性を有することが示されました。

［試験方法］
ヒトJAK1、JAK2、JAK3及びTYK2に、組換え型の各ペプチド基質を添加し、ルキソリチニブを作用させ、蛍光強度変化を指標にJAKファミリーに対する50%阻害濃度（IC₅₀）を算出した。

骨髄増殖性腫瘍モデルに対する作用（マウス）
変異型 JAK2 遺伝子（JAK2 V617F）を発現した腫瘍細胞移植モデルマウスにおける抗腫瘍作用

JAK2 変異によりJAK2のキナーゼ活性が亢進しているMPNのモデルを用いて、生存期間、脾腫に対するルキソリチニブの作用をin vivo で検討しました。
試験15日目から、溶媒群のマウスは病態の進展により死亡し、試験22日目までに溶媒群の90%超が死亡したのに対し、ルキソリチニブ群では90%超が生存していました（A）。溶媒群に死亡が認められた初日（試験15日目）に、接種細胞の増殖による脾腫及び腫瘍細胞量を評価したところ、溶媒群では顕著な脾腫が認められ、その平均重量は471mgでしたが、ルキソリチニブ群では110mgでした（B）。

［試験方法］
JAK2 V617F変異を発現するBa/F3-EpoR-JAK2 V617F細胞を静脈内接種（試験0日目）したマウスに溶媒又はルキソリチニブを90mg/kgの用量で1日2回経口投与し、病態の進展に対するルキソリチニブの作用を検討した。

野生型JAK を有する腫瘍細胞移植免疫不全モデルマウスにおける作用

INA-6腫瘍^＊（平均腫瘍体積>150mm³）を移植した、腫瘍細胞移植免疫不全モデルマウスに、10、30、60及び90mg/kgのルキソリチニブを投与し、腫瘍増殖抑制率を算出したところ、各用量群における腫瘍増殖抑制率は、それぞれ、41、80、92及び96%と用量依存的に抑制されました。
同様に、JAKシグナル伝達阻害作用を評価した結果、リン酸化STAT3レベルの用量依存的な抑制が認められました。このときの血漿中ルキソリチニブ濃度は、30mg/kg以上の投与量でin vitro におけるSTAT3リン酸化及び細胞増殖抑制におけるIC₅₀値（それぞれ、＜300nM及び186nM）を上回っており、ルキソリチニブが有効性を示す十分な濃度に達していることが確認されました。

［試験方法］
免疫不全マウスの皮下に、INA-6腫瘍^＊（平均腫瘍体積>150mm³）を移植し、腫瘍細胞移植免疫不全モデルマウスを作製した。このモデルマウスに、10、30、60及び90mg/kgのルキソリチニブを、1日2回、7日間経口投与し、溶媒を投与した対照群との腫瘍体積を比較することにより、腫瘍増殖抑制率を算出した。
また、モデルマウスにルキソリチニブを10、30、60及び90mg/kg投与し、4時間後に腫瘍検体を採取し、ELISA法により、総STAT及びリン酸化STAT3レベルを測定し、JAKシグナル伝達阻害作用を評価した。

＊INA-6腫瘍：形質細胞性白血病患者由来の骨髄腫／形質細胞腫

MPNに伴って生じるサイトカインに対する作用（in vitro）

健常人より分離した末梢血単核球細胞、及び血漿蛋白を含む全血に対するIL-6によるSTAT3リン酸化を、ルキソリチニブは抑制しました（IC₅₀：51nM、及び282nM）。 なお、ルキソリチニブは、ラット、ウサギ及びイヌ全血下でIL-6によるSTAT3のリン酸化を阻害しました（IC₅₀はそれぞれ95nM、600nM及び119nM）。